DNA直扩裂解液

Direct-PCR Lysis Buffer直扩裂解液为DNA快速提取专用试剂，可以用做普通PCR或SNP基因分型检测PCR扩增。该试剂在不明显影响PCR效果前提下，高效、快速处理样本，并短时间获取实验结果。

1实验步骤

样本裂解，稀释10~30倍— 混合PCR反应体系—3 PCR上机循环—电泳或者荧光扫描

2直扩样本处理方法

2.1钢珠打磨法样本处理

2.1.1  取约50px长植物叶片或者适量植物其他部位样本，置于深孔板，加5mm钢珠一颗，加固德生物400ul Direct-PCR Lysis Buffer ，高通量研磨机1800rpm（30赫兹） 研磨60s；

2.1.2  将深孔板3000rpm离心 3min；

2.1.3  吸10ul上清至普通PCR板，加90ul~290ul纯净水，混匀，待上机 。

（备注：根据研磨后上清的颜色深浅，可以对样本进行10到30倍的稀释，然后上机）

2.2煮沸法样本处理

2.2.1  取约0.5-25px长植物叶片或者适当量的植物其他部位样本，置于0.2mL八连管/0.2mL 96孔板，加入100uL固德生物Direct-PCR Lysis Buffer ，盖紧盖子/封板硅胶膜，放置沸水中煮沸10min；

2.2.2  将八连管/96孔板1000rpm轻甩20s；

2.2.3  吸10ul上清至普通PCR板，加90ul~290ul纯净水，混匀，待上机 。

（备注：根据研磨后上清的颜色深浅，可以对样本进行10到30倍的稀释，然后上机）

2.3动物细胞样本处理

PS：对于全血样本，在以下步骤开始前，应先对全血样本进行去血红素处理，然后收集沉淀细胞进行以下实验处理！

2.3.1  取适量细胞（去血红素的血细胞、培养细胞、微量组织块细胞或者口腔细胞）于1.5mL离心管/0.2mL八连管/0.2mL 96孔板, （如非细胞沉淀）3000rpm离心1min，去上清；

2.3.2  加入50~100uL 固德生物Direct-PCR Lysis Buffer，将细胞吹散约20s；

2.3.3  吸10ul上清至普通PCR板，加90ul纯净水，混匀，待上机 。

混合PCR反应体系（10μL体系为例，）

3.PCR上机循环，扫描荧光，分析:按照KASP试剂使用说明设置，NTC阴性对照须注意

(1) 含叶绿素叶片：KASP阴性对照（NTC）要含直扩裂解液等比例稀释，不能用水做阴性对照！

(2) 含口腔拭子保存液：KASP阴性对照（NTC）要包含和阳性孔一样，同比例的保存液和裂解液。