本试剂盒可直接快速地对小鼠组织（如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等）样本进行基因型鉴定，基因分型。无需提取DNA，电泳，只需要样本裂解 PCR反应 荧光定量扫描。具有极强的样本兼容性。
本试剂盒配备了强力的裂解缓冲液，可以快速裂解样品，释放基因组 DNA。裂解液可以直接加入到 PCR 反应体系中，无需中和，精提纯化，操作方便。
此外，本试剂盒对样品投入量要求低，5 mg 小鼠组织或 1-5 mm 鼠尾即可进行实验。
本试剂盒提供的FLU-ARMS 2x PCR mix VD 为 2 倍浓度的含荧光探针的PCR快速基因分型试剂。只需模板和引物即可完成实验，大大简化操作过程，降低污染几率。
该试剂盒可用于转基因鉴定、品质鉴定，小鼠基因分型等。
产品组分
货号 | 描述 | 规格 | 保存方法 |
GBS-1016-022 | Direct-PCR Lysis Buffer直扩裂解液 | 500 x 100ul reactions (50ml) | 2-8℃保存，有效期 1 年，请分装冻存，避免交叉污染。 |
BGH1001RVD | FLU-ARMS 2x PCR mix VD | 500 X 5ul reactions 2.5ml | -20℃保存，避免反复冻融。有效期 1 年。 |
FLU-ARMS 2x PCR mix VD快速检测试剂盒使用包含热启动 Taq DNA 聚合酶、dNTP 混合物、MgCl2、反应缓冲液、PCR 反应增强剂、荧光染料。
实验步骤：
1. 样本裂解，稀释5~10倍
1. 剪取 5-10 mg 动物组织或 1-5 mm 鼠尾，置于 1.5 mL 离心管中；
2. 在上述离心管中加入 50`100 UL Buffer ML，轻轻涡旋使得样品完全被裂解液浸润，短暂离心；
3. 在恒温孵育仪中设置 95℃孵育 15 min后，涡旋震荡10~30秒；
4. 选做步骤：12000 rpm 离心 2 min；
5. 将上清转移至新的离心管，用水稀释10~20倍（稀释10倍后可直接混合PCR，上机），4℃或-20℃保存或直接取上清用于后续 PCR 扩增
6. 吸10ul上清至普通PCR板，加90ul纯净水，混匀，待上机
【注】：组织应尽量剪碎，以便裂解反应更顺利进行。
【注】：95℃孵育，一般 15 min 即可满足多数 PCR 需求。若需要的 DNA 量较大或样品较难裂解，可将时间延长至 30 min。
组织块不需完全裂解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去
2. 混合PCR反应体系
组分 | 加量/μL | 备注 |
2x FLU-ARMS 2x PCR mix VD | 5 | |
引物mix | 0.4 | 分型引物1（10μM）：分型引物2（10μM）：下游通用引物R（10μM） = 0.1 : 0.1 : 0.3 （μL） |
处理后的样本（含直扩裂解液） | 5 | 稀释10~20倍后样本 |
（备注： 样本最低稀释不低于10倍，通常稀释10~20倍即可上PCR扩增，）
3. PCR上机循环，扫描荧光，分析
step 1 | 预变性 | 95℃ | 1 min | 1 循环 |
step 2 | 降落PCR | 95℃ | 12s | 10 循环 |
61→55℃,-0.6℃/循环 | 40 s | |||
step 3 | 扩增 | 95℃ | 12s | 32 循环 |
55℃ | 40 s | |||
step 4 | 读板 | 30℃ | 30 s （read） | 1 循环 |
备注：
表格中的循环数仅供初步参考，实际 DNA模板浓度 和 引物效率 会影响实际需要的循环数，具体确定方法可参考以下：
1. 如32个循环后，发现分型非常明显，且NTC（用于溶解模板的溶液）信号过高，与其他分型掺杂，下次扩增循环数调整为27；
2. 如32个循环后，发现所有信号区分不开，则将PCR产物用step 3的程序继续扩增5~ 7个循环后，再扫描荧光。
