1 . 阳性质控的意义
l 监控试剂运输过程是否造成性能损伤;
l 评估操作实验室平台效果,比如耗材、仪器等在实验中的适用性;
l 实验出现问题后,用于辅助分析查找原因。
2 . 阳性质控的组成
阳性质控分为:阳性质控1(fam)、阳性质控2(hex)和阳性质控3(杂合)三型,在此三型质控模板中,已经混合了相应的质控引物和DNA,无需额外再加引物和DNA模板。
3.阳性质控的用法
阳性质控已经混合了相应的质控引物和DNA,无需额外再加引物和DNA模板,只需要与Flu-Arms 2x pcr mix试剂按照1:1比例混合,随同其他位点引物一起上机,即可正常反应。建议每个阳性质控做两个复孔。
阳性质控的结果及常见原因分析
图一:试剂性能及平台良好的情况下,阳性质控分型结果;
图二:荧光较低,分型失败。有可能是试剂性能失效,或者程序运行循环数不够,或者仪器耗材方面存在问题,导致实验没扩增到产物,建议加5循环后在读数分析结果;
图三:荧光较高,NTC往杂合型靠拢,同时分型点无规则较分散。该情况说明试剂及平台都没问题,但实验程序运行循环数过多,导致产物过度扩增。建议再次实验时,降低3~5循环数。
图一
图二
图三
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